QUANSYSBIO 355149HU说明书

引言

Q-Plex Human Micronutrient v2 (7-Plex)

Q-Plex™ 人体微量营养素（7-复合物）临界反馈

微量营养素缺乏（MND）会对个人及其后代产生系统性和持久的影响（1）。MND影响全球人口，但对中低收入国家（LMIC）育龄儿童和妇女的影响不成比例。如果不进行治疗，MND会显著降低生活质量并造成致命后果。需要制定公共健康监测计划，以确定面临风险的人群，并确定要采取的适当干预措施。然而，已经表明，此类项目的可持续性取决于成本、能力发展和机构基础的位置（2）。

一些组织试图提供综合平台，以满足公共健康监测项目的需求。通常，只有在地区或国家以外的测试中心才能使用具有良好特征的方法。这里需要注意的一个重要群体是VitMin实验室（德国Willst?tt），该实验室通常被认为是通过传统的夹心ELISA方法测量微量营养素的金标准（3）。然而，这种偏好造成了对服务的高需求，并在不同情况下对研究人员造成了与出口相关的障碍（4）。因此，需要一种价格合理、准确且易于实施和使用的分析方法，以满足LMICs公共健康监测项目的需要。

多重微量营养素评估工具（MMAT）最初于2014年推出，是PATH（美国华盛顿州西雅图）和Quansys Biosciences（美国犹他州洛根）合作开发的一种多重ELISA。MMAT在正式发布后更名为Q-Plex人体微量营养素（5-Plex）。该分析同时评估了5种分析物的水平，包括铁蛋白、C反应蛋白（CRP）、α-1-酸性糖蛋白（AGP）、可溶性转铁蛋白受体（sTfR）和视黄醇结合蛋白4（RBP4）（5）。与传统ELISA相比，多重ELISA允许从小血样中生成和收集更多数据。此外，与其他多重ELISA平台不同，如Luminex和MagPix平台依赖于可能需要专门设施、培训和服务的流体系统，Q-Plex试剂盒是根据传统ELISA协议设计和遵循的，只需要相对较少的培训和专门设备。2017年，分析物小组扩大到包括甲状腺球蛋白（Tg）和组氨酸丰富蛋白II（HRP2），并更名为Q-Plex人类微量营养素（7-Plex）。这拓宽了分析的能力，使其能够指示碘的状态以及患者目前或最近是否感染了恶性疟原虫疟疾（6,7）。此外，确定使用干血点（DBS）作为样本类型适用于除铁蛋白外的所有分析物，铁蛋白在DBS中反映了血清铁蛋白与溶解红细胞的细胞内铁蛋白的混合物，混淆了测试结果（8）。

Quansys Biosciences和PATH以外的实验室对Q-Plex人体微量营养素（7-Plex）分析进行了广泛测试，以在现场广泛部署之前验证其性能。外部测试表明许多分析物具有良好的相关性，但确定了与更成熟的方法有关的数据相关性问题。一项研究表明，从Q-Plex人体微量营养素（7-Plex）和维生素产生的数据之间存在差异

尤其是sTfR、AGP、RBP4之间的差异，以及铁蛋白分析的敏感性（4）。CDC完成的第二项研究将Quansys ferritin、sTfR、CRP和AGP与罗氏临床分析仪的ferritin、sTfR、CRP和AGP进行了比较，并使用视黄醇HPLC参考标准对其中一些结果进行了支持，强调了sTfR和RBP4的可变性（9）。

CDC正在进行外部质量保证工作，以提高锰分析的标准化，为验证外部发现提供了一个支持平台。从CDC方法性能认证计划中获得40份样本，由罗氏临床分析仪对CRP、sTfR、铁蛋白、AGP和视黄醇HPLC进行10次单独运行，一式两份。在Q-Plex人体微量营养素（7-Plex）上生成的这些样品的数据与CDC的铁蛋白和CRP参考值（图1-2）很好地一致，但分析结果显示一致性较差

对于AGP、sTfR和RBP4，与先前研究的结果相关（图3-5）。此处未显示甲状腺球蛋白的数据，因为CDC参考样品尚未对该分析物进行表征。

综上所述，这些数据和第三方评估提供的反馈明确强调了需要改进的领域，以便MMAT分析成为现有方法的可行替代方法。简而言之，要点如下：

•铁蛋白分析的敏感性

•RBP4分析的精度

•sTfR和AGP数据与既定方法的相关性

Q-丛™ 人体微量营养素（7倍）数据

为了解决需要改进的领域，Quansys改进了工具，以生成Q-Plex人体微量营养素v2（7-Plex）。具体而言，新的捕获抗体提高了铁蛋白分析的灵敏度，同时仍保持与参考样品的相关性（图1）。这改变了分析范围，以确保样品分布更一致地落在可量化范围的中间，从而对铁蛋白含量较低的样品进行更精确的测量。（图6A）。

观察到的RBP4缺乏精确度被确定为与RBP4样本值低于或高于分析定量上限有关。为了应对这一挑战，对分析进行了重新校准，以确保所有内源性样本，而不仅仅是来自缺乏维生sA的个体的样本，都落入标准曲线的线性部分，其中定量更精确（图6B）。这是由于铁蛋白分析的灵敏度提高，使样品的工作稀释度从1:10增加到1:40。此外，使用CDC的血清微量营养素性能验证项目样本进行的测试数据显示，RBP4和视黄醇水平之间存在很强的相关性（R2=0.75）（图5）。

在RBP4和铁蛋白的1:40样品稀释法下，AGP、CRP、Tg、HRP2和sTfR均再次优化。

CRP和Tg的性能特征没有随新的样品稀释因子发生显著变化（图2），然而，AGP结果表明，优化改进了与参考值的相关性，同时也使数据点偏离了量化限制（图6C-D）。为了改进sTfR分析，确定了新的捕获和检测抗体集，并用于改善与CDC参考值的相关性（图4）。

改进微量营养素测定的最后一步是消除技术障碍，在使用相同的试剂盒和材料处理样品时，这可能会导致实验室之间的差异。在整个方案的培养步骤中，无需摇床即可优化分析。这不仅减轻了设备要求的负担，而且消除了因以可变速度运行的平板振动筛之间的差异而产生的任何变化。此外，Quansys还提供了对照样品，以确保分析性能。

总之，新优化的Q-Plex人体微量营养素v2（7-Plex）分析通过以下方式处理反?。?/span>

•提高铁蛋白分析的灵敏度

•提高RBP4分析的精确度

•改进sTfR和AGP数据与既定方法的相关性

•不再需要平板振动筛