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天然小鼠补体C1q蛋白
发布时间:2021/9/13
点击次数:482
genaxxon S5301.0250说明书
Order number: S5301.0250
该病毒 RNA 和 DNA 制备试剂盒旨在快速有效地从各种病原体生物(如病毒或细菌)中分离 RNA 和 DNA。样本可以是新鲜或冷冻的血浆/血液(用抗凝剂 EDTA、柠檬酸盐或 ACD 处理)、血清、其他无细胞体液或病原体感染的组织。该试剂盒专门设计用于使用低洗脱体积分离高质量核酸,并允许进行灵敏的下游分析,包括定量 PCR 和 RT-PCR。纯化的 RNA/DNA 不含蛋白质和核酸酶。病毒 RNA 和 DNA 制备试剂盒使用包含离液盐的裂解缓冲液来灭活 RNases/DNases,并使用先进的硅胶膜技术快速纯化完整的 RNA/DNA。
优化了制备程序,可在 30 分钟内提供可重现的结果。
制备程序:
从血浆、血清、尿液、细胞培养上清液、无细胞液体或病毒感染组织中制备
将 150 µL 血浆、血清、尿液、细胞培养上清液、无细胞液体或病毒感染组织转移到 1.5 mL 微管中.
注意:使用 PBS 缓冲液将较低的样品体积调整为 150µL。更大体积(高达 300 µL)的样品可以轻松放大,但可能需要更大的管用于裂解过程。
加入 300µL(2 个样品体积)的裂解缓冲液。
涡旋 15 秒。
在室温 (20°C - 25°C) 下孵育 10 分钟。
加入 300µL(2 倍样品体积)结合缓冲液,轻轻涡旋混合均匀。
从鼻腔或咽喉拭子制备
将 150µL PBS 缓冲液转移到 1.5 ml 微管中。
添加 300µL 裂解缓冲液。
用收集到的鼻腔或喉咙细胞切断 cutton端, 并将其放入微管中。
关闭管子并涡旋 15 秒。
在室温 (20°C - 25°C) 下孵育 10 分钟。
加入 300µL 结合缓冲液,轻轻涡旋混合均匀。
纯化程序
色谱柱装载
将离心柱放入提供的 2mL 收集管中。
将裂解液加载到柱子上,并以 13,000 g 离心 1 分钟。
注意:色谱柱储液器的最大体积为 800μL。对于较大的样品体积,丢弃流通液并再次加载色谱柱/旋转。
丢弃收集管中的流通液,并将色谱柱放回同一管中。
柱洗涤
在 Spin Column 中加入 500µL Washing Buffer A 并以 13,000 g 离心 1 分钟。
丢弃收集管中的流通液,并将 Spin Column 放回同一管中。
将 500µL 洗涤缓冲液 B 添加到 Spin Column 并以 13,000 g 离心 1 分钟。
注意:在第一次使用洗涤缓冲液 B 之前,按照瓶子上的指示添加乙醇。
丢弃收集管中的流通液,并将 Spin Column 放回同一管中。
以 13,000 g 离心 1 分钟。
注意:干燥膜很重要,因为残留的乙醇可能会干扰下游反应。
洗脱
将 Spin Column 放入新的 1.5 ml 微管(未提供)中。
将 30-60µL Elution Buffer 直接加入离心柱的膜上。
注意:避免用移液器吸头接触膜。
在室温下孵育 1 分钟。
以 13,000 g 离心 1 分钟。
洗脱的 RNA 和/或 DNA 可用于下游处理或在 -80°C 下储存。
使用 2-5µL 作为 PCR 或 RT-PCR 的模板。