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发布时间:2019/3/6
点击次数:1677
omegabiotek D6943-01说明书
E.Z.N.A.® Plasmid Mini Kit I, (V-spin)
使用旋转微型柱从1-5mL细菌培养物中分离质粒DNA
SKU:D6943-01类别:细菌质粒标签:D6943-00,D6943-01,D6943-02
EZNA®PlasmidMini Kit I设计用于在30分钟或更短的时间内从1-5 mL细菌培养物中分离出多达30μg的高质量质粒DNA。使用HiBind®MiniColumn技术将质粒DNA纯化简化为三个快速步骤:结合,洗涤和洗脱。纯化的质粒DNA可立即用于各种下游应用,例如常规筛选,限制酶消化和手动/自动荧光DNA测序。
EZNA®质粒微型试剂盒可提供2种不同类型的色谱柱:V型旋转色谱柱带有附加盖(D6943),而Q型离心色谱柱则无盖(D6942)。在使用和应用方面,这些柱子是相同的。两种色谱柱均可与真空或离心方案一起使用。
仅供研究使用。不用于诊断过程。
| 特征 | 产品规格 |
|---|---|
| 下游应用 | 克隆; 桑格排序,转型等 |
| 起始材料 | 1-5mL LB培养物 |
| 质粒类型 | 高拷贝,低拷贝,粘粒DNA |
| 处理模式 | 手动,离心或真空 |
| 吞吐量 | 1-24 |
| DNA结合技术 | 硅胶微型旋转柱 |
| 裂解液清除方法 | 离心 |
| 处理时间 | <30分钟 |
| 产量 | 高拷贝数15-25μg; 低拷贝数0.1-5μg |
| 特别说明 | 停用酵母质粒试剂盒的替代方案 |
| 项目 |
|---|
| HiBind®DNA微型柱 |
| 2 mL收集管 |
| 解决方案一 |
| 解决方案II |
| 解决方案III |
| HBC缓冲液 |
| DNA洗涤缓冲液 |
| RNase A. |
| 洗脱缓冲液 |
DNA浓度比较

图1. 根据制造商推荐的方案进行用pGEM载体转化的4mLDH5α培养物。通过NanoDrop®2000c的光密度测量确定质粒DNA浓度。总洗脱体积为50μL。
超卷曲DNA

图2. 根据标准方案分离用pGEM载体转化的1mLDH5α培养物。在1%琼脂糖凝胶上分析5μL洗脱物质粒DNA。
Nanodrop的DNA定量分析

表1. 用pGEM载体转化的1mLDH5α培养物。通过NanoDrop®2000c的光密度测量确定质粒DNA浓度。总洗脱体积为50μL。
桑格测序

表2. 用EZNA质粒Mini Kit I纯化的质粒DNA用于5μLSanger测序反应。在Applied Biosystems 3730XL上分析DNA。
内毒素水平

表3. 质粒DNA制备物中的内毒素。按照每个制造商推荐的方案,从0.8mL LB培养物中分离质粒DNA。用Thermo Scientific的Pierce LAL Chromogenic Endotoxin Quantitation Kit测定内毒素水平。
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