qa-bio E-PNG01说明书
PNGase F从糖蛋白切割N-连接（天冬酰胺连接的）寡糖。
产品编号 - 酶的量
E-PNG01 - 60μLs¹E
-PNG01-20 - 20μLs¹E
-PNG01-200 - 200μls²（以前的E-PNG05）
¹包括缓冲液，变性剂和Triton-
X²仅含酶
PNGase F，肽N糖苷酶F，N-糖苷酶，N-聚糖酶
PNGase F从糖蛋白切割N-连接（天冬酰胺连接的）寡糖。该酶将天冬酰胺脱氨基成天冬氨酸，使寡糖保持完整。变性增加了解理速率。大多数天然蛋白质仍然可以*N-去糖基化，但必须增加孵育时间。酶在反应条件（37℃）下保持*活性至少96小时。PNGase F不会去除通常在植物糖蛋白上发现的含有α-（1,3） - 连接的核心岩藻糖的寡糖; 为此目的，使用肽N-糖苷酶A.
有许多替代酶可用于去除N-聚糖，特别是Endo F家族的酶和Endo H.这些酶切割寡糖核心中的两个N-乙酰氨基葡萄糖残基，产生截短的糖在天冬酰胺上残留一个N-乙酰氨基葡萄糖残基的分子。这留下带电荷的糖，其可以帮助将蛋白质保持在溶液中，所述溶液在用PNGase F去糖基化后沉淀，其去除了完整的寡糖。Endo F1切割高甘露糖和一些杂合型N-聚糖。Endo F2将去除双触角和高甘露糖（降低40倍速率）。Endo F3释放出triantennarry和岩藻糖基化的双触角N-聚糖。远藤H. 去除杂交或高甘露糖聚糖。
来源 Elizabethkingia miricola（是Chryseobacterium meningosepticum）
EC 3.5.1.52
PDB 1PGS
UniProt Q9XBM8
内容
PNG酶的F的20mM的Tris-HCl，pH 7.5中
包含20μL和60μL包装尺寸：
5x反应缓冲液7.5 - 250 mM磷酸钠，pH 7.5
变性溶液 - 2％SDS，1Mβ-巯基乙醇
Triton X-100 - 15％溶液
比活力 > 25 U / mg
活性 5U / ml
分子量 36,000道尔顿
pH范围 6-10，宜7.5
方案
1.在Eppendorf管中加入高达200μg的糖蛋白。用去离子水调节至35μl终体积。
2.加入10μl5x反应缓冲液7.5和2.5μl变性溶液。在100°C加热5分钟。
很酷。加入2.5μlTritonX-100并混合。
4.向反应中加入2.0μl酶。在37°C孵育3小时。
特异性切除所有天冬酰胺连接的复合物，杂交或高甘露糖寡糖，除非α（1-3）核心岩藻糖基化; 天冬酰胺必须在两个末端肽结合，Endo F游离
比活性定义为在37℃，pH7.5下在1分钟内催化从1微摩尔变性的RNase B释放N-连接的寡糖所需的酶量。通过SDS-PAGE监测切割（切割的RNase B迁移更快）。
储存在4°C储存酶。
