同城约会微信群全国600城市空降高端私人配对 ,上海大圈高端空姐,qq小妹二维码图片 ,同城空降服务

欢迎进入上海起发实验试剂有限公司!
资料下载
首页 > 资料下载 > qa-bio E-PNG01说明书

qa-bio E-PNG01说明书

 发布时间:2019/2/18 点击量:411

qa-bio E-PNG01说明书

 

PNGase F.

PNGase F从糖蛋白切割N-连接(天冬酰胺连接的)寡糖。

 

产品编号 - 酶的量
E-PNG01 - 60μLs¹

E -PNG01-20 - 20μLs¹

E -PNG01-200 - 200μls²(以前的E-PNG05)
   ¹包括缓冲液,变性剂和Triton- 
   X²仅含酶

 

PNGase F,肽N糖苷酶F,N-糖苷酶,N-聚糖酶

PNGase F从糖蛋白切割N-连接(天冬酰胺连接的)寡糖。该酶将天冬酰胺脱氨基成天冬氨酸,使寡糖保持完整。变性增加了解理速率。大多数天然蛋白质仍然可以*N-去糖基化,但必须增加孵育时间。酶在反应条件(37℃)下保持*活性至少96小时。PNGase F不会去除通常在植物糖蛋白上发现的含有α-(1,3) - 连接的核心岩藻糖的寡糖; 为此目的,使用肽N-糖苷酶A.

有许多替代酶可用于去除N-聚糖,特别是Endo F家族的酶和Endo H.这些酶切割寡糖核心中的两个N-乙酰氨基葡萄糖残基,产生截短的糖在天冬酰胺上残留一个N-乙酰氨基葡萄糖残基的分子。这留下带电荷的糖,其可以帮助将蛋白质保持在溶液中,所述溶液在用PNGase F去糖基化后沉淀,其去除了完整的寡糖。Endo F1切割高甘露糖和一些杂合型N-聚糖。Endo F2将去除双触角和高甘露糖(降低40倍速率)。Endo F3释放出triantennarry和岩藻糖基化的双触角N-聚糖。远藤H. 去除杂交或高甘露糖聚糖。

来源 Elizabethkingia miricola(是Chryseobacterium meningosepticum

EC 3.5.1.52 
PDB 1PGS 
UniProt Q9XBM8

内容
PNG酶的F的20mM的Tris-HCl,pH 7.5中

包含20μL和60μL包装尺寸:
5x反应缓冲液7.5 - 250 mM磷酸钠,pH 7.5 
变性溶液 - 2%SDS,1Mβ-巯基乙醇
Triton X-100 - 15%溶液

比活力 > 25 U / mg

活性 5U / ml

分子量 36,000道尔顿

pH范围 6-10,宜7.5

方案
1.在Eppendorf管中加入高达200μg的糖蛋白。用去离子水调节至35μl终体积。
2.加入10μl5x反应缓冲液7.5和2.5μl变性溶液。在100°C加热5分钟。
很酷。加入2.5μlTritonX-100并混合。
4.向反应中加入2.0μl酶。在37°C孵育3小时。

特异性切除所有天冬酰胺连接的复合物,杂交或高甘露糖寡糖,除非α(1-3)核心岩藻糖基化; 天冬酰胺必须在两个末端肽结合,Endo F游离

比活性定义为在37℃,pH7.5下在1分钟内催化从1微摩尔变性的RNase B释放N-连接的寡糖所需的酶量。通过SDS-PAGE监测切割(切割的RNase B迁移更快)。

储存在4°C储存酶。

 

 

 

文件下载    
上一条:ludger酶
下一条:cytoskeleton AAC01说明书