advansta K-11054-010说明书

SpectraDye抗体标记试剂盒

只需一个简单步骤即可制作自己的荧光抗体。

• 快速简便 - 30分钟内一步贴标
• Versatile - 标记抗体与免疫荧光显微镜，流式细胞术，蛋白质印迹兼容
• 灵活 - 从6种常用荧光染料中选择
• 节省时间和金钱 - 没有辅助或额外步骤，一旦您标记您的主要
• 保存抗体 - 标记反应只需要10μg抗体

试剂盒包括：
抗体标记缓冲液
SpectraDye Dye Solution * 
淬灭溶液
中和缓冲液

足够的试剂可以标记多达1毫克的抗体
*除了试剂盒K-11060-010

描述

SpectraDye抗体标记试剂盒包括足够的试剂，可以标记多达1 mg的抗体。SpectraDye染料试剂盒包含抗体标记缓冲液，SpectraDye染料溶液，淬火溶液和中和缓冲液。用户提供的染料套装不含染料，但含有高质量的DMSO，可用于制备自己的染料溶液。

什么是SpectraDye抗体标记试剂盒有用吗？

基于免疫荧光的实验的较低背景：使用二抗可导致高的非特异性结合和低再现性。切换到直接标记的一抗可以改善您的结果。

单色荧光应用：直接标记抗体可提高重复性，并允许在各种应用中使用相同的抗体来验证结果。

多色荧光应用： SpectraDye抗体标记试剂盒有6种染料可供选择，具有极大的灵活性，而且由于您不需要二抗，因此您的一抗的种类无关紧要。 

标签反应涉及什么？

标签反应确实快速而简单。首先将PBS中的抗体稀释至1mg / ml。接下来，将25μl抗体标记缓冲液加入100μl抗体溶液中。通过上下移液*混合。向反应中加入12μl染料溶液并通过移液管混合。在室温下孵育30分钟。其他推荐步骤：向反应混合物中加入3μl淬火溶液，在室温下孵育5分钟; 然后，向反应混合物中加入8μl中和缓冲液。抗体被标记并准备使用。

实验应用：

免疫荧光显微镜：在同一载玻片上分析多种抗原时，减少非特异性结合并消除物种交叉反应。

通过使用高质量的单克隆抗体增加多色染色载玻片的特异性。将HeLa细胞固定在玻璃盖玻片上，然后用中性驴血清封闭。然后用一组高亲和力SpectraDye标记的小鼠单克隆抗体同时染色细胞。用SpectraDye-490（品红色）标记抗GAPDH抗体，用SpectraDye-650（红色）标记抗肌动蛋白抗体，用SpectraDye-550（绿色）标记抗微管蛋白抗体。细胞核用DAPI（蓝色）染色。

流式细胞仪：   使用您自己的荧光标记的一抗，简化流式细胞仪检测，降低可变性，提高数据质量。

SpectraDye抗体标记试剂盒产生的抗体可与市售的荧光抗体相媲美。HeLa细胞在补充有FBS和青霉素/链霉素的DMEM培养基中培养。沉淀细胞并用4％多聚甲醛固定。将HeLa细胞重悬于PBS + 0.1％Triton中，并以0.33μg/μL加入SpectraDye标记的抗体。将抗体在环境温度下孵育30分钟，然后用1X PBS洗涤两次。使用LSRFortessa获取数据。黑色填充的直方图表示抗体染色的细胞。黑色衬里，灰色直方图表示未染色的控制。

Western Blotting：节省宝贵的时间，因为不再需要二抗孵育和洗涤步骤。

使用SpectraDye标记的一抗在单个荧光Western印迹实验中检测两种或更多种蛋白质。将转铁蛋白（500ng /泳道）和GAPDH（500,167,56和19ng /泳道）转移至PVDF膜，用用SpectraDye-IR800标记的兔抗转铁蛋白抗体和用其标记的小鼠抗GAPDH抗体检测。 SpectraDye-IR700。